中药分离方法和有效成分提取分离研究
　　中药研究的水平及中药质量的保障在很大程度上依赖于中药有效成分提取分离的结果。与传统中药有效成分提取分离方法相比，新型分离技术具有明显的优越性。运用此类高新技术研究现代中药，是中药现代化的重要途径，必将为中药现代化研究注入新的活力。
　　槐花米
　　槐花米简称槐米，所含主要成分为芦丁，又称为芸香苷，即槲皮素3-O-芸香糖苷，槲皮素为5，7，3′，4′-四OH黄酮。
　　芦丁溶解度在冷水中1:10000，沸水中1:200，沸乙醇中1:60，沸甲醇中1:7，可溶于乙醇、吡啶、甲酰胺、甘油、丙酮、冰乙酸、乙酸乙酯中，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚。
　　芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液中，酸化后又析出，因此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁。
　　芦丁分子中因含有邻二酚羟基，性质不太稳定；暴露在空气中能缓缓氧化变为暗褐色，在碱性条件下更容易被氧化分解。硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的，故在碱性溶液中加热提取芦丁时，往往加入少量硼砂。有7-OH、4′-OH，酸性强，可用于提取。芦丁可溶于沸水（1：200），微溶于冷水（1：10000）此性质可用于提取与精制。
　　芦丁的提取方法，此法简称碱提酸沉法，可用于生产。需注意的是碱提时，碱性一定不可太强（pH8～9），如pH太高，则结构有可能降解，而使收率降低，甚至结构完全破坏。
　　芦丁的另一种提取方法是沸水提取法，即取槐米粗粉加10倍热水煮沸20～30分钟，过滤，再加水煮1～2次，合并几次煮提液，冷却放置数小时后即可析出芦丁粗品，过滤，用水重结晶一次，可得水精制品芦丁，再用甲醇重结晶一次，可得纯度更高的芦丁。
　　超临界流体萃取技术
　　超临界流体萃取是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对目标组分进行萃取和分离的新型技术。与传统的提取分离法相比，超临界流体萃取技术较大的优点是可以在近常温条件下提取分离不同极性、不同沸点的化合物，几乎保留中药中全部有效成分，无有机溶剂残留，因此，其中药有效成分提取的纯度高，而且收率高，操作简单、节能。有研究发现，用超临界流体萃取技术提取川芎中的阿魏酸含量可达0.04％，而溶媒法提取阿魏酸含量仅为0.02％。说明超临界流体萃取技术在中药提取分离中的应用前景广阔，特别是对一些资源少、疗效好、剂量小、附加值高的中药极为适用。
　　大孔树脂吸附法
　　大孔树脂吸附分离技术是以采用特殊的吸附剂从中药复方煎液中有选择地吸附其中的有效成分，除去无效成分的一种提取精制的新工艺。此外，大孔吸附树脂还可应用于中药有效成分样品组成含量测定前的预分离。该方法具有设备简单、操作方便、节省能源、成本低、产品纯度高、不吸潮等优点，因此大孔树脂吸附法在中药研究和生产中的应用日益广泛。将这种方法应用于中药有效成分的分离取得了相当显着的成果。近年来，大孔吸附树脂法已广泛地应用于中药有效成分
　　的分离与精制。有报道研究发现，用6种大孔树脂吸附法分离竹叶黄酮，其中AB－8树脂较宜于竹叶黄酮的提纯，经AB－8树脂吸附分离后，提取物中黄酮含量提高1倍以上。采用大孔树脂法精制脑康口服液，结果经大孔树脂法精制的脑康口服液澄明度明显提高。目前，该技术已在国内广泛用于纯化苷类、黄酮类、生物碱类成分。随着有关基础研究的进一步深入，以及相关标准、法规的进一步完善，大孔树脂精制纯化技术必将成为推动中药现代化的重要手段。
　　半仿生提取法
　　半仿生提取法(简称SBE)是近几年提出的新方法。它是从生物药剂学的角度，将整体药物研究法与分子药物研究法相结合，模拟口服药物经胃肠道转运吸收的环境，采用活性指导下的导向分离方法；是经消化道口服给药的制剂设计的一种新的提取工艺。
　　半仿生提取法的主要特点，一是提取过程符合中医配伍和临床用药的特点和口服药物在胃肠道转运吸收的特点。二是在具体工艺选择上，既考虑活性混合成分又以单体成分作指标，这样不仅能充分发挥混合物的综合作用，又能利用单体成分控制中药制剂的质量。三是有效成分损失少。在对多个单味中药和复方制剂的研究中，半仿生提取法已经显示出较大的优势和广泛的应用前景。有研究以阿魏酸、苦参碱、苦参总碱及干浸膏为指标，采用SBE和水提取法（WE法）对当归苦参丸的提取工艺进行比较研究，经4个指标综合评价发现，SBE法优于WE法。但目前半仿生提取法仍沿袭高温煎煮方式，容易影响许多有效活性成分，降低药效。因此，有学者建议将提取温度改为近人体温度，在提取液中加入拟人体消化酶活性物质，使提取过程更接近于药物在人体胃肠道的转运吸收过程，更符合辨证施治的中医药理论。
　　酶工程技术
　　酶工程技术是近几年来用于重要工业的一项生物工程技术。传统的提取方法如煎煮、有机溶剂浸出醇处理方法等，提取时温度高、提取率低、浪费乙醇、成本高、不安全，而选用适当的酶，可以通过酶反应温和地将植物组织分解，加速有效成分的释放提取。选用相应的酶可将影响液体制剂澄清度的杂质如淀粉、蛋白质、果胶等分解祛除，也可促进某些极性低的脂溶成分转化成糖苷类易溶于水的成分而有利于提取。酶法在药物提取中有较大的应用潜力，但该技术也存在一定的局限性。酶提取法对实验条件要求比较高，为使酶发挥较大作用，需先通过实验确定，掌握较适合的温度、pH值及作用时间等。
　　超微粉碎技术
　　超微粉碎是近年来迅速发展起来的高新技术，能把原材料加工成微米甚至纳米级的微粉。尤适用于纤维多的植物类中药材的粉碎，从而提高药物吸收率、生物利用度，增强靶向性。超微粉碎主要应用于一些贵重药材及稀有药材的粉碎，如人参、珍珠、三七、天麻、全蝎、羚羊角等。但应针对具体品种，确定其较适粒度，才能更好地发挥超微粉碎的作用。有些药材则不适合用超微粉碎，如含淀粉、黏液质较多的药材，这些无效成分会因超微粉碎大量暴露而被释放出来，影响有效成分的释放与吸收。
　　高速离心分离技术
　　离心分离是通过离心机的高速运转，使离心加速度超过重力加速度的成百上千倍，而使沉降速度增加，以加速药液中杂质沉淀并除去的一种方法。结合运用多级过滤法，注射剂生产中的预滤，可以大大提高滤速和效果，省时省力，且能提高注射剂的澄清度。高速离心作为一种物理分离技术，在其分离过程中能有效地防止中药中有效成分的损失，较大限度地保存药物的活性成分，且还可缩短工艺流程。
　　高速逆流色谱分离技术
　　高速逆流色谱分离技术是一种不用任何载体或支撑体的液-液分配色谱技术。该技术分离效率高，产品纯度高，不存在载体对样品的吸附和污染，具有制备量大和溶剂水泵少等优点，可广泛应用于生物工程、医学、医药、化工、食品等领域。上世纪80年代后期，广泛应用于天然药物成分的分离制备和分析中。有报道用该技术研究生物碱、黄酮、蒽醌、香豆素等成分的分离都取得了较好的效果。高速逆流色谱分离法不仅适用于非极性化合物的分离，也适用于极性化合物的分离，还可以应用于进行中药粗提物中各组分的分离或进一步的纯化精制。该技术有望成为中药有效成分质量标准研究、分析的一种新方法，也会成为中药制剂生产的一种新型分离技术。
　　分子印迹分离技术
　　分子印迹分离技术，就是以待分离的化合物为印迹分子（也称模板、底物），制备对该类分子有选择性识别功能的高分子聚合物——分子印迹聚合物，然后以这种分子印迹聚合物(MIP)为固定相来进行色谱分离的技术。其较大的特点是分子识别性强，选择性高，而且制得的MIP有高度的交联性，固定相不易变形，有良好的机械性能和较长的使用寿命。分子印迹分离技术是一种高效的中药有效成分分离技术。有研究显示，与传统的分离纯化方法比较，采用环糊精分子印迹聚合物分离纯化葛根素，可将葛根素一步分离纯化到98％，收率达80％以上，而传统的方法进行分离纯化则需要6步，且收率仅为10％左右。
　　铅盐法
　　此法过去曾用于研究，目前已很少采用。一般是在乙醇或甲醇溶液中依次加入适量中性醋酸铅、碱式醋酸铅水液，分别使具有邻二酚羟基成分（包括黄酮）及含羟基成分，具有一般酚羟基的成分分离，再分别将铅盐沉淀悬浮于醇中，脱铅后得到成分。
　　硼酸铬合法
　　有邻二酚羟基的黄酮类化合物可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此可与无邻二酚羟基的黄酮类化合物相互分离。
　　pH梯度萃取法
　　pH梯度萃取法适合于酸性强弱不同的游离的黄酮类化合物的分离，将混合物溶于有机溶剂（如乙醚）中，依次用5％NaHCO3（萃取出7，4′－二羟基黄酮）、5％Na2CO3（萃取出7－或4′－羟基黄酮）、0.2％NaOH（萃取出具一般酚羟基黄酮）、4％NaOH（萃取出5－羟基黄酮）萃取而使之分离。
　　此外，超声提取技术、微波辅助萃取技术、分子精馏和短程精馏、中药絮凝分离技术、双水相萃取技术、液泛法、空气爆破法等，都陆续在中药有效成分提取分离技术中得到了应用。可以预测，这些现代高新技术对于推动中药现代化步伐将起到深远的影响。